Seguindo os passos do pai, estudou administração na Universidade da Califórnia, mas depois resolveu mudar de curso para teatro. Começou, então, a atuar em peças e chamar atenção. Por seus papéis no Festival de Teatro Lafayette, em Nova York, Del Toro foi convidado para entrar ao Circle in The Square Acting School e depois para a escola Stella Adler Conservatory, onde ganhou uma bolsa de estudo.
O próximo passo foi se mudar para Los Angeles. Depois de dois anos morando na cidade, conseguiu seu primeiro papel na série Miami Vice em 1984. Sua carreira no cinema começou mais tarde, só em 1988, no longa Meu Filme Circense. No ano seguinte, conseguiu um papel em um dos filmes da série James Bond.
Com os Suspeitos ganhou o prêmio de Melhor Ator Coadjuvante no Independent Spirit Award. Ele volta a receber o mesmo prêmio, por seu desempenho em Basquiat - Traços de uma Vida, sendo a primeira vez que um ator o conquista duas vezes seguidas.
Seu primeiro grande papel veio apenas em 1997, com Excesso de Bagagem, ao lado de Alicia Silverstone, que também produziu o filme e escolheu Benicio a dedo. No ano seguinte, atuou em Medo e Delírio, e dividiu as telonas com Johnny Depp. Para o longa, ganhou 18 kilos.
Em 2000, Benicio teve reviravolta em sua carreira. Em Traffic, de Steven Soderbergh, ele conquistou o Oscar e o Globo de Ouro de Ator Coadjuvante.
Escolhido como uma das personalidades mais bonitas do mundo (e conhecido como o Brad Pitt portorriquenho), ele é famoso por seus papéis de bad boy, como gangster e viciado em drogas (Coisas que Perdemos no Caminho e 21 Gramas).
Steven Soderbergh, em 2008, repetiu a dose de sucesso em Traffic e o convidou para atuar nos dois volumes do filme Che. A produção fez Benicio ganhar o prêmio de interpretação masculina no Festival de Cannes para o Melhor Ator Principal.
Seu próximo desafio é viver um homem lobo em o Lobisomem, que estreia essa semana no Brasil.
Filmografia:
1988 - Meu filme Circense
1989 - 007 - Permissão Para Matar
1991 - Unidos pelo sangue
1991 - A Lua dos Amantes
1992 - Cristóvão Colombo - A Aventura do Descobrimento
1993 - Ovos de ouro
1993 - Dinheiro, pra que dinheiro?
1993 - Sem medo de viver
1994 - O Preço da Ambição
1995 - Os Suspeitos
1995 - Fallen angels, good housekeeping
1996 - Basquiat - Traços de uma Vida
1996 - Estranha obsessão
1996 - Os chefões
1996 - Duplo engano
1996 - Cannes Man
1997 - Excesso de Bagagem
1998 - Medo e Delírio
2000 - Pão e Rosas
2000 - Snatch - Porcos e Diamantes
2000 - A Sangue Frio
2000 - Traffic
2001 - A Promessa
2003 - Caçado
2003 - 21 Gramas
2005 - Sin City - A Cidade do Pecado
2007 - Coisas que Perdemos pelo Caminho
2008 - Che
2008 - O Argentino
2009 - O Lobisomem
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